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免疫组化注意事项

来源:北京家圆医院 点击:2386

2011-10-18

  近20年来,免疫组织化学技术在病理学诊断领域的研究和应用越来越广泛,甚至已经成为了病理诊断尤其是肿瘤的鉴别诊断中不可缺少的较重要的辅助手段,使病理学诊断达到了一个新的高度,也为检测肿瘤组织的相关抗原以及指导临床治疗和预后提供了重要依据。然而,免疫组化是一种多步骤、多因素决定的科学实验方法,存在很多干扰因素,影响染色结果,甚至可能导致误判或误诊。那免疫组化注意事项有哪些呢?不孕不育专家将其总结为一下几点。

  免疫组化注意事项

  1、为达到免疫组织化学技术的要求,组织固定越新鲜越好。

  2、组织脱水必须干净。

  3、切片必须完整、均匀、平展、无邹折。

  4、切片的附贴必须牢固,必须使用合适的粘贴剂。

  5、切片必须烘烤附贴牢固,既要经得起抗原修复时高温的作用而不使轻易脱片,又不至于破坏抗原。

  6、切片脱蜡必须干净,否则将会影响免疫组化染色的最终结果。

  7、必须抑制内源性过氧化物酶的活性,才能降低背景的染色。

  8、须适当合理地使用封闭试剂。

  9、选择合适的抗体。

  10、连接抗体的选用必须,否则可造成假阴性的现象。

  11、复合物的使用及孵育时间的确定。

  12、PBS的冲洗。

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